冷凍治療過程中，組織和細(xì)胞經(jīng)歷凍結(jié)、融化等過程是導(dǎo)致其損傷的關(guān)鍵因素。

　　1、冷凍降溫時(shí)的作用

　　緩慢降溫時(shí)，低溫?fù)p傷源于“溶液效應(yīng)”(即高溶液/溶質(zhì)濃度下，細(xì)胞嚴(yán)重脫水);快速降溫時(shí)，低溫?fù)p傷源于致命的細(xì)胞內(nèi)冰晶形成。一些細(xì)胞存在冷凍保存的最佳冷卻速率，證明了這一假說的合理性。

　　2、冷凍后復(fù)溫作用

　　快速復(fù)溫，組織在較高溫度的情況下，處于高濃度的電解質(zhì)中，易于破壞;緩慢復(fù)溫，可使組織在真正溶解前(常在-10℃～0℃)再次形成冰晶，由此形成大冰晶破壞細(xì)胞膜。

　　3、細(xì)胞膜損傷

　　低溫使構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分脂質(zhì)-蛋白復(fù)合物變性，致使細(xì)胞破裂。

　　4、溫度休克

　　低溫引起的局部溫度突然下降致使細(xì)胞發(fā)生低溫性休克，引起細(xì)胞死亡。

　　5、血管性因素

　　冷凍引起血管痙攣，毛細(xì)血管內(nèi)皮發(fā)生改變，血小板微血拴形成，血液有形成分破壞并形成凝塊。此外，在冷凍作用下，毛細(xì)血管通透性增加，從而引起血粘度增加，靜水壓改變，血流緩慢。冷凍區(qū)周圍動(dòng)靜脈分流開放，也可造成血流減少，導(dǎo)致組織缺血缺氧性壞死。故有學(xué)者認(rèn)為血管性因素所致微循環(huán)障礙是冷凍后組織壞死的主要原因。

　　6、臨界細(xì)胞容積學(xué)說

　　認(rèn)為在冷凍區(qū)進(jìn)展中，細(xì)胞水分喪失，細(xì)胞皺縮，只能耐受到最小容積。超過此極限，細(xì)胞就破壞，從而造成組織損傷。

　　7、凋亡 在冷凍的分子生物學(xué)研究過程中發(fā)現(xiàn)冷凍的邊緣區(qū)部分細(xì)胞有凋亡小體，部分細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡過程。

　　二、液氮容器冷凍方法

　　1、液氮淺低溫冷凍：通過對(duì)細(xì)胞和組織無明顯損傷作用使局部皮膚治療溫度控制在-1℃～6℃之間，從而產(chǎn)生某些生物學(xué)效應(yīng)以達(dá)到治療目的冷凍方法。液氮淺低溫冷凍作用機(jī)制：

　　(1)血管性因素：由于較弱的冷刺激，局部血管先保護(hù)性收縮，復(fù)溫后毛細(xì)血管反射性擴(kuò)張，溫度升高，促進(jìn)了血管的新生和改善了血管的舒縮功能;

　　(2)神經(jīng)系統(tǒng)因素：由于局部冷刺激，可通過神經(jīng)傳導(dǎo)，調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能;同時(shí)，又通過反射作用于植物神經(jīng)，也調(diào)節(jié)了皮膚血管的收縮功能;

　　(3)表皮增生。

　　2、液氮深低溫冷凍：通過對(duì)細(xì)胞和組織產(chǎn)生損傷或壞死作用以達(dá)到治療目的的冷凍方法。自增壓液氮罐